引言

二氢吡啶脱氢酶（Dihydropyrimidine Dehydrogenase, DPD）是嘧啶代谢途径中的关键酶，主要负责催化尿嘧啶和胸腺嘧啶的还原反应。在临床治疗中，DPD活性对化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）的代谢至关重要。研究表明，DPD活性缺陷患者使用5-FU后可能出现严重甚至致命的毒性反应。因此，二氢吡啶脱氢酶检测已成为个体化医疗的重要组成部分，用于评估患者药物代谢能力及制定安全用药方案。

检测范围

DPD检测主要适用于以下人群及场景：

• 接受5-FU或卡培他滨治疗的癌症患者：预防因DPD缺陷导致的骨髓抑制、神经毒性等不良反应；
• 有药物代谢异常家族史者：筛查遗传性DPD酶缺乏症；
• 化疗后出现严重副作用的患者：追溯毒性原因并调整后续治疗方案；
• 新生儿代谢疾病筛查：早期发现先天性DPD缺乏症。

检测项目

目前临床常用的DPD检测项目包括：

• DPD酶活性测定：直接评估酶催化反应速率；
• DPYD基因多态性分析：检测IVS14+1G>A、c.2846A>T等常见突变位点；
• 尿嘧啶/二氢尿嘧啶比值测定：间接反映DPD功能状态；
• 5-FU血药浓度监测：动态评估药物代谢效率。

检测方法

根据检测目标的不同，主要采用以下三类方法：

• 酶活性测定法：通过放射标记或分光光度法测量DPD催化反应产物生成量，金标准为放射性同位素标记法，灵敏度可达0.1 pmol/min/mg蛋白；
• 分子生物学技术：采用PCR-RFLP、Sanger测序或二代测序（NGS）检测DPYD基因突变，覆盖率达99%以上已知致病位点；
• 液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）：精准定量尿嘧啶及其代谢物，检测限低至0.5 ng/mL。

检测仪器

不同检测方法需配套仪器设备：

• 酶标仪：用于比色法酶活性检测，波长范围覆盖300-750 nm；
• 基因测序仪：如Illumina NovaSeq 6000，通量高达6 Tb/次运行；
• 三重四极杆质谱仪：Agilent 6495C LC-MS/MS系统，MRM模式实现高特异性定量；
• 全自动生化分析仪：Roche Cobas 8000系列支持批量样本快速检测。

质量控制与标准化

为确保检测结果可靠性，实验室需实施严格质控措施：

• 采用Certified Reference Material（CRM）进行方法学验证；
• 每批次检测加入正常/低活性双水平质控品；
• 定期参加EMQN（欧洲分子遗传质控网络）室间比对；
• 基因检测须通过Sanger测序对阳性结果进行复核。

临床决策阈值

依据2023年NCCN指南建议：

• 酶活性<70%正常值：禁止使用标准剂量5-FU；
• 携带1个DPYD致病突变：剂量调整为50%-75%；
• 尿嘧啶/二氢尿嘧啶>1.5：提示DPD部分缺陷需谨慎用药。

结论

二氢吡啶脱氢酶检测通过多维度评估患者的药物代谢能力，显著降低化疗相关毒性风险。随着质谱技术和分子诊断的发展，检测灵敏度和特异性持续提升。建议在5-FU用药前常规开展DPD筛查，并结合基因型与表型数据进行综合判读，以实现肿瘤治疗的精准化与安全性。未来，基于人工智能的代谢表型预测模型有望进一步优化检测策略。

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